Direct spectrophotometric method to determine cell density of Isochrysis galbana in serial batch cultures from a larger scale fed-batch culture in exponential phase

Abstract

In this work, a very useful and accurate procedure, based on the spectrophotometric method published by the American Public Health Association in the Standards Methods for the Examination of Water and Wastewater, was developed to determine cell density of Isochrysis galbana performing a single direct absorbance measurement in exponential phase of growth, which is the desirable operating mode for any microalgae production plant. Thus, Isochrysis galbana was cultured in serial batch cultures from a larger scale fed-batch culture. The growth performance of this species of microalgae under laboratory conditions was analysed by spectrophotometry at different wavelengths and cell counting in a haemocytometer (Neubauer chamber) showing that doubling times and cell death increased with increasing initial cell density. Besides, it was demonstrated that the absorbance of these cultures followed a linear trend as a function of time and cell density during the exponential phase of growth, results in which the developed direct method is based on.

En este trabajo, se ha determinado un procedimiento muy útil y preciso basado en el método espectrofotométrico descrito por la Asociación Americana Pública de Salud en los Métodos Estándar para el Análisis de Aguas y Aguas Residuales, para calcular la densidad celular de cultivos de Isochrysis galbana realizando una única medida de absorbancia en fase exponencial de crecimiento que es el modo de trabajo deseable de cualquier planta de producción de microalgas. De este modo, se realizó una serie de cultivos de Isochrysis galbana en discontinuo a partir de otro cultivo a mayor escala con alimentación intermitente. Se ha analizado el nivel de crecimiento de esta especie de microalga por espectrofotometría a diferentes longitudes de onda y recuento de células en un hemocitómetro (cámara de Neubauer) mostrando que el tiemplo de duplicación y la muerte celular aumentó con el aumento de la densidad celular inicial. Además, se ha demostrado que la absorbancia de estos cultivos sigue una tendencia lineal en función del tiempo y densidad celular durante la fase de crecimiento exponencial, resultados en los cuales se basa el método directo desarrollado.